Paramagnetic Nanoparticles as a Platform for FRET-Based Sarcosine Picomolar Detection

dc.contributor.authorHeger, Zbyněkcs
dc.contributor.authorCernei, Natalia Vladimirovnacs
dc.contributor.authorKřížková, Soňacs
dc.contributor.authorMasařík, Michalcs
dc.contributor.authorKopel, Pavelcs
dc.contributor.authorHodek, Petrcs
dc.contributor.authorZítka, Ondřejcs
dc.contributor.authorAdam, Vojtěchcs
dc.contributor.authorKizek, Renécs
dc.coverage.issue8868cs
dc.coverage.volume5cs
dc.date.accessioned2020-08-04T11:04:02Z
dc.date.available2020-08-04T11:04:02Z
dc.date.issued2015-03-09cs
dc.description.abstractHerein, we describe an ultrasensitive specific biosensing system for detection of sarcosine as a potential biomarker of prostate carcinoma based on Forster resonance energy transfer (FRET). The FRET biosensor employs anti-sarcosine antibodies immobilized on paramagnetic nanoparticles surface for specific antigen binding. Successful binding of sarcosine leads to assembly of a sandwich construct composed of anti-sarcosine antibodies keeping the Forster distance (Ro) of FRET pair in required proximity. The detection is based on spectral overlap between gold-functionalized green fluorescent protein and antibodies@quantum dots bioconjugate (lex 400 nm). The saturation curve of sarcosine based on FRET efficiency (F604/F510 ratio) was tested within linear dynamic range from 5 to 50 nM with detection limit down to 50 pM. Assembled biosensor was then successfully employed for sarcosine quantification in prostatic cell lines (PC3, 22Rv1, PNT1A), and urinary samples of prostate adenocarcinoma patients.en
dc.description.abstractV tomto dokumentu, popíšeme ultrasensitivní specifický biosnímací systém pro detekci sarkosinu jako potenciálního biomarker karcinomu prostaty na základě Forster přenosu rezonanční energie (FRET). Pražec biosensoru zaměstnává anti-protilátku sarkosinu, která je imobilizovaná na povrchu paramagnetických nanočástic pro specifickou antigenní vazbu. Úspěšná vazba sarkosinu vede k sestavení sendvičové konstrukce složené z anti-protilátky sarkosinu, udržení Forster vzdálenost (RO) a FRET páru v požadované blízkosti. Detekce je založena na spektrálním překryvu mezi zlatem s funkčním zeleným fluorescenčním proteinem, protilátkou a kvantovými tečkami Bioconjugate (400 nm). Saturace křivky sarkosinu na základě FRET účinnosti (F604 / F510 poměr) byl testován v lineárním dynamickém rozsahu od 5 do 50 nM s detekčním limitem až do 50 pM. Montované biosenzor byl pak úspěšně použity pro sarkosinu kvantifikacics
dc.formattextcs
dc.format.extent1-7cs
dc.format.mimetypeapplication/pdfcs
dc.identifier.citationScientific Reports. 2015, vol. 5, issue 8868, p. 1-7.en
dc.identifier.doi10.1038/srep08868cs
dc.identifier.issn2045-2322cs
dc.identifier.other113367cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/63720
dc.language.isoencs
dc.publisherNature Publishing Groupcs
dc.relation.ispartofScientific Reportscs
dc.relation.urihttp://www.nature.com/articles/srep08868cs
dc.rightsCreative Commons Attribution 4.0 Internationalcs
dc.rights.accessopenAccesscs
dc.rights.sherpahttp://www.sherpa.ac.uk/romeo/issn/2045-2322/cs
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/cs
dc.subjectCANCERen
dc.subjectDIAGNOSTIC MARKERSen
dc.titleParamagnetic Nanoparticles as a Platform for FRET-Based Sarcosine Picomolar Detectionen
dc.title.alternativeParamagnetické nanočástice jako platforma pro FRET-Based pikomolární detekci sarkosinucs
dc.type.driverarticleen
dc.type.statusPeer-revieweden
dc.type.versionpublishedVersionen
sync.item.dbidVAV-113367en
sync.item.dbtypeVAVen
sync.item.insts2020.08.04 13:04:02en
sync.item.modts2020.08.04 12:31:12en
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Středoevropský technologický institut VUT. Chytré nanonástrojecs
Files
Original bundle
Now showing 1 - 1 of 1
Loading...
Thumbnail Image
Name:
srep08868.pdf
Size:
4.6 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
srep08868.pdf