Paramagnetic Nanoparticles as a Platform for FRET-Based Sarcosine Picomolar Detection
Loading...
Date
2015-03-09
ORCID
Advisor
Referee
Mark
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Nature Publishing Group
Altmetrics
Abstract
Herein, we describe an ultrasensitive specific biosensing system for detection of sarcosine as a potential
biomarker of prostate carcinoma based on Forster resonance energy transfer (FRET). The FRET biosensor
employs anti-sarcosine antibodies immobilized on paramagnetic nanoparticles surface for specific antigen
binding. Successful binding of sarcosine leads to assembly of a sandwich construct composed of
anti-sarcosine antibodies keeping the Forster distance (Ro) of FRET pair in required proximity. The
detection is based on spectral overlap between gold-functionalized green fluorescent protein and
antibodies@quantum dots bioconjugate (lex 400 nm). The saturation curve of sarcosine based on FRET
efficiency (F604/F510 ratio) was tested within linear dynamic range from 5 to 50 nM with detection limit
down to 50 pM. Assembled biosensor was then successfully employed for sarcosine quantification in
prostatic cell lines (PC3, 22Rv1, PNT1A), and urinary samples of prostate adenocarcinoma patients.
V tomto dokumentu, popíšeme ultrasensitivní specifický biosnímací systém pro detekci sarkosinu jako potenciálního biomarker karcinomu prostaty na základě Forster přenosu rezonanční energie (FRET). Pražec biosensoru zaměstnává anti-protilátku sarkosinu, která je imobilizovaná na povrchu paramagnetických nanočástic pro specifickou antigenní vazbu. Úspěšná vazba sarkosinu vede k sestavení sendvičové konstrukce složené z anti-protilátky sarkosinu, udržení Forster vzdálenost (RO) a FRET páru v požadované blízkosti. Detekce je založena na spektrálním překryvu mezi zlatem s funkčním zeleným fluorescenčním proteinem, protilátkou a kvantovými tečkami Bioconjugate (400 nm). Saturace křivky sarkosinu na základě FRET účinnosti (F604 / F510 poměr) byl testován v lineárním dynamickém rozsahu od 5 do 50 nM s detekčním limitem až do 50 pM. Montované biosenzor byl pak úspěšně použity pro sarkosinu kvantifikaci
V tomto dokumentu, popíšeme ultrasensitivní specifický biosnímací systém pro detekci sarkosinu jako potenciálního biomarker karcinomu prostaty na základě Forster přenosu rezonanční energie (FRET). Pražec biosensoru zaměstnává anti-protilátku sarkosinu, která je imobilizovaná na povrchu paramagnetických nanočástic pro specifickou antigenní vazbu. Úspěšná vazba sarkosinu vede k sestavení sendvičové konstrukce složené z anti-protilátky sarkosinu, udržení Forster vzdálenost (RO) a FRET páru v požadované blízkosti. Detekce je založena na spektrálním překryvu mezi zlatem s funkčním zeleným fluorescenčním proteinem, protilátkou a kvantovými tečkami Bioconjugate (400 nm). Saturace křivky sarkosinu na základě FRET účinnosti (F604 / F510 poměr) byl testován v lineárním dynamickém rozsahu od 5 do 50 nM s detekčním limitem až do 50 pM. Montované biosenzor byl pak úspěšně použity pro sarkosinu kvantifikaci
Description
Keywords
Citation
Document type
Peer-reviewed
Document version
Published version
Date of access to the full text
Language of document
en