Identifikace DNA rostlinných a živočišných druhů v potravinách použitím polymerázové řetězové reakce

Abstract

Na tři potravinové alergeny rostlinného původu – soju, pistácie a mandle – jsme vyvíjeli metody na jejich detekování v potravinách. Na detekci sóje (Glycine max) v potravinách jsme použili real-time PCR orientovanou na gen lec kódující lektin specifický pro sóju. Na tuto cílovou sekvenci byl orientovaný PCR systém s primery Le2F a Le2R a se sondou Le2P typu Taqman. Byla stanovena inkluzivita i exkluzivita systému, dále byl zjištěn detekční limit (2,75 pg) a praktický detekční limit (0,02 %). Celý navržený systém pak byl kvantifikován. Na detekci pisácií (Pistacia) byla použita real-time PCR založená na primerech a sondě orientované na gen COR kódující dehidrin. Byla stanovena inkluzivita i exkluzivita systému, dále byl zjištěn detekční limit (3,5 pg) a praktický detekční limit (0,002 %). Na detekci mandlí (Amygdalus) se nepodařilo vyvinout žadný systém, který by 100 % splňoval všechny kvalitativní parametry.We were developing detection methods for three food allergens of plant origin. We used real-time PCR for soy detection in food oriented on gene lec, that is coding lektine specific for soy. On this target sequence were oriented PCR system with primers Le2F and Le2R and TaqMan probe Le2P. Detection limit (2,75 pg), practical detection limit (0,02 %), inclusivity and exclusivity were determined. Whole system were quantified. Real-time PCR for pistachio detection were based on primers and probe for gene COR. Detection limit (3,5 pg), practical detection limit (0,002 %), inclusivity and exclusivity were determined. For almond detection we were not succeed system, that fulfil all qualitative parametres.