Fluorescenční spektroskopie ve výzkumu organizace biologických membrán

but.committeeprof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda) doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen) doc. Ing. Zdenka Kozáková, Ph.D. (člen) prof. Mgr. Martin Vala, Ph.D. (člen) prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (místopředseda)cs
but.defenceObhajoba bakalářské práce proběhla podle následujícího schématu: prezentace studenta-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Student přednesl výborný výtah výsledků své práce, řádně zodpověděl všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagoval na připomínky. V diskusi tak student prokázal výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky práce. Komise zhodnotila jeho práci celkově jako výbornou. Pekař: Kam až se dostala sonda v rámci bakterie? Jak se připravila sonda Laurdan? Vala: Jaké je struktura sondy Laurdan a jaký je mechanismus jejího navázání na bakterii? Co zachycuje škála na fluorescenčních snímcích? Jak dlouho vydrží sonda svítit?cs
but.jazykčeština (Czech)
but.programChemie pro medicínské aplikacecs
but.resultpráce byla úspěšně obhájenacs
dc.contributor.advisorMravec, Filipcs
dc.contributor.authorVítek, Ondřejcs
dc.contributor.refereeObruča, Stanislavcs
dc.date.created2023cs
dc.description.abstractBakalářská práce se zabývá srovnáním a optimalizací metod studia biologických membrán pomocí fluorescenční spektroskopie a mikroskopie s využitím bakterie Cupriavidus necator H16 (obsahující PHB granule) a PHB-4 (neobsahující PHB granule) jako modelového organismu. Experimentálně byla určena vhodná koncentrace sondy laurdan pro barvení biologických membrán a čas potřebný k jejímu průniku do buňky. Takto obarvené organismy byly dále studovány pomocí steady-state spektrofluorimetrie, při které byl zkoumán vliv teploty na tvar emisního spektra a také možnost promývání jako jednoho z kroků při přípravě vzorků. Obě tato měření naznačují výhodnost promývání, ale neposkytují nezpochybnitelné výsledky. Rozdíl mezi dvěma kmeny bakterie byl ale pozorován. Dále byly bakterie podrobeny fluorescenční mikroskopii. Tato metoda se projevila jako potenciálně užitečná pro studium výraznějších variací ve stupni uspořádání membrán buněčné membrány a pro zobrazování dalších větších útvarů. Distribuce laurdanu v rámci Cupriavidu necator H16 působí nerovnoměrněji ve srovnání s PHB-4. Získané poznatky tak naznačují vliv přítomnosti granulí při barvení fluorescenčními sondami, nelze je ale interpretovat jednoznačně.cs
dc.description.abstractThis bachelor's thesis deals with the comparison and optimization of methods for studying biological membranes using fluorescence spectroscopy and microscopy, utilizing the bacteria Cupriavidus necator H16 (containing PHB granules) and PHB-4 (not containing PHB granules) as model organisms. The appropriate concentration of the membrane probe laurdan for staining biological membranes and the time required for its penetration into the cell were determined. Organisms stained in this way were further studied using steady-state spectroscopy, which helped examine the influence of temperature on the shape of the emission spectrum and the possibility of washing as one of the steps in sample preparation. Both of these measurements suggest the advantages of washing but do not provide definite results. However, a clear difference between the two bacterial strains was observed. Furthermore, the bacteria were studied by fluorescence microscopy. This method proved to be potentially useful for studying significant variations in the membrane order of the cell membrane and for imaging other larger structures. The distribution of laurdan within Cupriavidus necator H16 appears more uneven compared to PHB-4. The findings thus suggest the influence of granule presence when staining with fluorescent probes, but they cannot be interpreted definitively.en
dc.description.markAcs
dc.identifier.citationVÍTEK, O. Fluorescenční spektroskopie ve výzkumu organizace biologických membrán [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2023.cs
dc.identifier.other148007cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/210754
dc.language.isocscs
dc.publisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemickács
dc.rightsStandardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezenícs
dc.subjectCupriavidus necatorcs
dc.subjectfluorescenční spektroskopiecs
dc.subjectfluorescenční mikroskopiecs
dc.subjectlaurdancs
dc.subjectbiomembránacs
dc.subjectCupriavidus necatoren
dc.subjectfluorescence spectroscopyen
dc.subjectfluorescence microscopyen
dc.subjectlaurdanen
dc.subjectbiomembraneen
dc.titleFluorescenční spektroskopie ve výzkumu organizace biologických membráncs
dc.title.alternativeFluorescence spectroscopy in research on the organization of biological membranesen
dc.typeTextcs
dc.type.driverbachelorThesisen
dc.type.evskpbakalářská prácecs
dcterms.dateAccepted2023-06-13cs
dcterms.modified2023-06-13-15:58:48cs
eprints.affiliatedInstitution.facultyFakulta chemickács
sync.item.dbid148007en
sync.item.dbtypeZPen
sync.item.insts2025.03.16 12:56:51en
sync.item.modts2025.01.15 16:53:06en
thesis.disciplinebez specializacecs
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. Ústav fyzikální a spotřební chemiecs
thesis.levelBakalářskýcs
thesis.nameBc.cs
Files
Original bundle
Now showing 1 - 2 of 2
Loading...
Thumbnail Image
Name:
final-thesis.pdf
Size:
2.56 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
final-thesis.pdf
Loading...
Thumbnail Image
Name:
review_148007.html
Size:
9.29 KB
Format:
Hypertext Markup Language
Description:
file review_148007.html
Collections