Stanovení laktosy v mléčných výrobcích

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá stanovením obsahu laktózy v mléčných výrobcích pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s detekcí rozptýleného světla po odpaření (ELSD). Cílem práce bylo ověřit, zda je touto metodou možné spolehlivě kvantifikovat obsah laktózy v reálných mléčných vzorcích po vysrážení bílkovin pomocí ethanolu. V rámci experimentu bylo analyzováno několik druhů komerčně dostupného polotučného mléka včetně bezlaktózových variant, a metoda byla validována. Limit detekce optimalizované metody byl 61 mg · l, limit kvantifikace 202 mg · l za předpokladu celkového ředění analyzovaného mléka 150×. Přesnost za podmínek opakovatelnosti se pohybovala kolem 2%. Správnost metody byla ověřena provedením testu výtěžnosti, který poskytl výslednou výtěžnost 89%. Reprodukovatelnost se nepodařilo kvůli technickým problémům ověřit. Navržená metoda byla použita pro analýzu reálných vzorků mléka. Výsledky analýz ve všech případech korelovaly s množstvím sacharidů uváděným na obalech výrobci.This bachelor's thesis focuses on the determination of lactose content in dairy products using high-performance liquid chromatography (HPLC) with evaporative light scattering detection (ELSD). The aim of the study was to verify whether this method can reliably quantify lactose content in real dairy samples after protein precipitation using ethanol. Several types of commercially available semi-skimmed milk, including lactose-free variants, were analyzed during the experiment, and the method was validated. The detection limit of the optimized method was 61 mg · l, and the quantification limit was 202 mg · l, assuming a total dilution of the analyzed milk by a factor of 150. The precision under repeatability conditions was around 2%. The accuracy of the method was verified by performing a recovery test, which yielded a recovery rate of 89%. Due to technical issues, reproducibility could not be verified. The proposed method was applied to the analysis of real milk samples. In all cases, the results of the analyses correlated with the carbohydrate content stated on the product labels by the manufacturers.