Příprava a charakterizace teplotně citlivých liposomů
Loading...
Date
Authors
Struhár, Richard
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Teplotne citlivé lipozómy (TSL) predstavujú atraktívnu platformu pre lokálne podávanie biologicky aktívnych látok s riadeným uvoľňovaním, kedy pri miernom zvýšení teploty prechádza ich lipidová dvojvrstva fázovým prechodom a stáva sa tak priepustnejšou pre enkapsulovaný obsah. Práca je zameraná na prípravu, charakterizáciu a funkčné testovanie TSL založených na fosfolipide dipalmitoylfosfatidylcholín (DPPC) s prídavkom rôznych koncentrácií lyzolipidu monopalmitoylfosfatidylcholín (MPPC). Boli zvolené zloženia s obsahom dilauroylglycerofosfátu sodného (PA) aj bez. V prvej fáze boli pripravené vezikuly metódou hydratácie tenkého lipidového filmu (pre rôzne zloženia DPPC:PA:MPPC) v celkovej koncentrácii 5 mmol/dm3 lipidov. Následne boli unilamelarizované 15-násobnou extrúziou cez 100nm membránu. Veľkosť a PDI (index polydisperzity) sa stanovili metódou DLS (dynamický rozptyl svetla), zeta potenciál metódou ELS (elektroforetický rozptyl svetla). Fázové prechody membrán boli sledované fluorescenčnou spektrometriou, ktorou bola zmeraná anizotropia dvoma sondami DPH (difenylhexatrién) a derivátom TMA-DPH (trimetylamónium difenylhexatrién) pri teplotách 10 až 70 °C. Na najperspektívnejšom zložení 90:10 mol. % (DPPC:Lyso PC) bola testovaná kinetika enkapsulovaného hydrofilného kalceínu. Vzorky s 10 mol. % Lyso-PC a 90 mol. % DPPC boli monodisperzné, Z-average 125 nm, PDI
Temperature-sensitive liposomes (TSLs) represent an attractive platform for the delivery of controlled-release biologically active agents, whereby upon a slight increase in temperature, their lipid bilayer undergoes a phase transition and thus becomes more permeable to the encapsulated content. This work focuses on the preparation, characterization, and functional testing of TSLs based on phospholipid dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) with the addition of different lysolipid monopalmitoylphosphatidylcholine (MPPC) concentrations. Compositions both with and without sodium dilauroylglycerophosphate (PA) were chosen. In the first stage, vesicles were prepared by the thin lipid film hydration method (for different compositions of DPPC:PA:MPPC) at a total lipid concentration of 5 mmol/dm3. Subsequently, they were unilamellarized by 15-fold extrusion through a 100 nm membrane. Size and PDI (polydispersity index) were determined by DLS (dynamic light scattering), zeta potential by ELS (electrophoretic light scattering). The phase transitions of the membranes were monitored by fluorescence spectrometry, which measured anisotropy with two probes DPH (diphenylhexatriene) and its derivative TMA-DPH (trimethylammonium diphenylhexatriene) at temperatures between 10 and 70 °C. The kinetics of the encapsulated hydrophilic calcein was tested on the most promising 90:10 mol. % composition (DPPC:Lyso PC). Samples with 10 mol. % Lyso-PC and 90 mol. % DPPC were monodisperse, Z-average was around 125 nm, PDI
Temperature-sensitive liposomes (TSLs) represent an attractive platform for the delivery of controlled-release biologically active agents, whereby upon a slight increase in temperature, their lipid bilayer undergoes a phase transition and thus becomes more permeable to the encapsulated content. This work focuses on the preparation, characterization, and functional testing of TSLs based on phospholipid dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) with the addition of different lysolipid monopalmitoylphosphatidylcholine (MPPC) concentrations. Compositions both with and without sodium dilauroylglycerophosphate (PA) were chosen. In the first stage, vesicles were prepared by the thin lipid film hydration method (for different compositions of DPPC:PA:MPPC) at a total lipid concentration of 5 mmol/dm3. Subsequently, they were unilamellarized by 15-fold extrusion through a 100 nm membrane. Size and PDI (polydispersity index) were determined by DLS (dynamic light scattering), zeta potential by ELS (electrophoretic light scattering). The phase transitions of the membranes were monitored by fluorescence spectrometry, which measured anisotropy with two probes DPH (diphenylhexatriene) and its derivative TMA-DPH (trimethylammonium diphenylhexatriene) at temperatures between 10 and 70 °C. The kinetics of the encapsulated hydrophilic calcein was tested on the most promising 90:10 mol. % composition (DPPC:Lyso PC). Samples with 10 mol. % Lyso-PC and 90 mol. % DPPC were monodisperse, Z-average was around 125 nm, PDI
Description
Keywords
DPPC, teplotne citlivé lipozómy, lyzolipid, fázový prechod membrány, fluorescenčná anizotropia, fluidita membrány, dynamický rozptyl svetla (DLS), kinetika uvoľňovania, DPPC, temperature-sensitive liposomes, lysolipid, membrane phase transition, fluorescence anisotropy, membrane fluidity, dynamic light scattering (DLS), release kinetics
Citation
STRUHÁR, R. Příprava a charakterizace teplotně citlivých liposomů [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2025.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
sk
Study field
bez specializace
Comittee
prof. Ing. Martina Klučáková, Ph.D. (předseda)
doc. Ing. Vojtěch Enev, Ph.D. (člen)
prof. RNDr. František Krčma, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Zdenka Kozáková, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Filip Mravec, Ph.D. (místopředseda)
Date of acceptance
2025-06-12
Defence
Obhajoba bakalářské práce proběhla podle následujícího schématu: prezentace studenta-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Student přednesl výborný výtah výsledků své práce, řádně zodpověděl všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagoval na připomínky. V diskusi tak student prokázal výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky práce. Komise zhodnotila jeho práci celkově jako výbornou.
Klučáková: Jak jste určil počáteční koncentraci kalceinu při uvolňování?
Dzik: Prosím upřesněte metodiku stanovení uvolněného kalceinu.
Krčma: Jaké jsou nejistoty uvedených výsledků?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení