Evaluace přítomnosti probiotických bakterií v potravinovém doplňku pomocí molekulárně biologických metod
Loading...
Date
Authors
Dvornyi, Nikolai
ORCID
Advisor
Referee
Mark
C
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Probiotika jsou prospěšné mikroorganismy, které při správném podávání schopny přinášet hostiteli zdravotní benefity, například podporu trávení a posílení imunitního systému. Jejich účinnost a přínosy závisí na konkrétním kmenu mikroorganismu. Proto je velmi důležitě mít metody rychlé a spolehlivé pro identifikaci MO. Tyto kmeny jsou často z rodů Lactobacillus, Bifidobacterium, a představují přirozené hostiteli gastrointestinálního traktu. Tato bakalářská práce se zaměřuje na identifikaci probiotických bakterií v komerčně dostupném doplňku stravy Linex® Forte pomocí molekulárně biologických metod, především polymerázové řetězové reakce (PCR). Cílem bylo ověřit přítomnost deklarovaných probiotických kultur Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis, a porovnat výsledky s údaji uvedenými výrobcem. K tímto účelům byly použity dvě metody izolace DNA: fenolchloroformová extrakce a komerční purifikační kit OMNI International. Následně byla izolovaná DNA analyzována pomocí doménově, rodově a druhově specifické PCR. Výsledky ukazují, že použité metody jsou vhodné pro identifikaci probiotických bakterií a potvrzují jejich přítomnost ve vybraném výrobku.
Probiotics are beneficial microorganisms that, when administered properly, can provide health benefits to the host, such as aiding digestion and boosting the immune system. Their effectiveness and benefits depend on the specific strain of microorganism. These strains are often from the genera Lactobacillus, Bifidobacterium, and represent natural hosts of the gastrointestinal tract. This bachelor thesis focuses on the identification of probiotic bacteria in a commercially available dietary supplement Linex® Forte using molecular biological methods, mainly polymerase chain reaction (PCR). The aim was to verify the presence of the claimed probiotic cultures of Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis, and to compare the results with the manufacturer's claims. Therefore, two DNA isolation methods were used: phenolchloroform extraction and the commercial purification kit OMNI International. The isolated DNA was then analyzed by domain, genus and species-specific PCR. The results show that the methods used are suitable for the identification of probiotic bacteria and confirm their presence in the selected product.
Probiotics are beneficial microorganisms that, when administered properly, can provide health benefits to the host, such as aiding digestion and boosting the immune system. Their effectiveness and benefits depend on the specific strain of microorganism. These strains are often from the genera Lactobacillus, Bifidobacterium, and represent natural hosts of the gastrointestinal tract. This bachelor thesis focuses on the identification of probiotic bacteria in a commercially available dietary supplement Linex® Forte using molecular biological methods, mainly polymerase chain reaction (PCR). The aim was to verify the presence of the claimed probiotic cultures of Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis, and to compare the results with the manufacturer's claims. Therefore, two DNA isolation methods were used: phenolchloroform extraction and the commercial purification kit OMNI International. The isolated DNA was then analyzed by domain, genus and species-specific PCR. The results show that the methods used are suitable for the identification of probiotic bacteria and confirm their presence in the selected product.
Description
Citation
DVORNYI, N. Evaluace přítomnosti probiotických bakterií v potravinovém doplňku pomocí molekulárně biologických metod [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2024.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Biochemická technologie
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (místopředseda)
prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D. (člen)
doc. RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Eva Vítová, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2024-06-12
Defence
1. Student seznámil členy komise s náplní a cílem bakalářské práce.
2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci.
3. Student akceptoval všechny připomínky oponenta a odpověděl na otázky.
Diskuse:
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc.
Uvádíte mikroskopii jasného/temného pole, můžete to objasnit?
Došlo tedy k ověření bakterií v daném výrobku? Byl výrobek dostatečně kvalitní k validaci metody? Jakým dalším způsobem je možné kmeny bakterií ověřit? Co bylo použito jako pozitivní kontrola?
prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D.
Zmínil jste, že je možné pomocí elektronové mikroskopie identifikovat bakterie, mohl byste to objasnit?
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D.
U jednotlivých kroku PCR zmiňujete teplotu žíhání, můžete to objasnit?
Jak je možné detekovat výsledky PCR? Jaké existují další metody? Na jakém přístroji jste měřil PCR?
Student dobře odpověděl na doplňující otázky členů komise, které byly v průběhu diskuse k dané problematice vzneseny. Student prokázal dobré odborné znalosti i schopnost samostatné prezentace dosažených výsledků.
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení