Charakterizace PHA produkujících buněk pomocí pokročilých mikroskopických a cytometrických technik
Loading...
Date
Authors
Dlouhá, Karolína
ORCID
Advisor
Referee
Mark
B
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Cílem této bakalářské práce je zdokumentovat produkci polyhydroxyalkanoátů u vybraných bakteriálních kmenů, kterými byly Pseudomonas thermotolerans, Chelatococcus daeguensis, Tepidiphilus thermophilus a Chelatococcus thermostellatus. U mikroorganismů Tepidiphilus thermophilus a Pseudomonas thermotolerans zatím nebyla produkce PHA pospána a u bakterií rodu Chelatococcus, které byly v této práci analyzovány, nebyla produkce zdokumentována pomocí elektronové mikroskopie. V této práci byly vybraní producenti analyzováni nejdříve pomocí průtokové cytometrie s použitím fluorescenčních sond BODIPY a Nilská červeň. Vybraní producenti, u kterých se produkce potvrdila, byly analyzováni dalšími metodami, kterými byly fluorescenční mikroskopie, cryo-skenovací elektronové mikroskopie a na závěr transmisní elektronová mikroskopie. U bakteriální kultury Pseudomonas thermotolerans se produkce PHA nepotvrdila již při první analýze pomocí průtokového cytometru. U ostatních mikroorganismů byla produkce potvrzena. Bakterie rodu Chelatococcus se jasně prokázaly jako lepší producenti. Bakteriální buňky Tepidiphilus thermophilus produkovaly menší granule a v menším množství.
The aim of this bachelor thesis is to document production of polyhydroxyalkanoates in selected bacterial strains, which were Pseudomonas thermotolerans, Chelatococcus daeguensis, Tepidiphilus thermophilus and Chelatococcus thermostellatus. In the case of the microorganisms Tepidiphilus thermophilus and Pseudomonas thermotolerans, the production of PHA´s has not yet been described, and in the Chelatococcus bacteria, which were analysed in this work, the production has not yet been documented by electron microscopy. In this work, the selected producers were analysed by flow cytometry first, using BODIPY and Nile Red as fluorescence probes. Selected producers, for which was production confirmed, were analysed by other methods, such as fluorescence microscopy, cryo scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. In the bacterial culture of Pseudomonas thermotolerans, PHA´s production wasn´t confirmed by the first analysis by flow cytometer. For other microorganisms was production confirmed. Chelatococcus bacteria clearly proved to be better producers. Bacterial cells of Tepidiphilus thermophilus produced smaller granules and in lower amount.
The aim of this bachelor thesis is to document production of polyhydroxyalkanoates in selected bacterial strains, which were Pseudomonas thermotolerans, Chelatococcus daeguensis, Tepidiphilus thermophilus and Chelatococcus thermostellatus. In the case of the microorganisms Tepidiphilus thermophilus and Pseudomonas thermotolerans, the production of PHA´s has not yet been described, and in the Chelatococcus bacteria, which were analysed in this work, the production has not yet been documented by electron microscopy. In this work, the selected producers were analysed by flow cytometry first, using BODIPY and Nile Red as fluorescence probes. Selected producers, for which was production confirmed, were analysed by other methods, such as fluorescence microscopy, cryo scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. In the bacterial culture of Pseudomonas thermotolerans, PHA´s production wasn´t confirmed by the first analysis by flow cytometer. For other microorganisms was production confirmed. Chelatococcus bacteria clearly proved to be better producers. Bacterial cells of Tepidiphilus thermophilus produced smaller granules and in lower amount.
Description
Keywords
polyhydroxyalkanoáty, průtoková cytometrie, fluorescenční mikroskopie, kryo skenovací elektronová mikroskopie, transmisní elektronová mikroskopie, Pseudomonas thermotolerans, Chelatococcus daeguensis, Tepidiphilus thermophilus, Chelatococcus thermostellatus, polyhydroxyalkaonates, flow cytometry, fluorescence microscopy, cryo scanning electron microscopy, transmission electron microscopy, Pseudomonas thermotolerans, Chelatococcus daeguensis, Tepidiphilus thermophilus, Chelatococcus thermostellatus
Citation
DLOUHÁ, K. Charakterizace PHA produkujících buněk pomocí pokročilých mikroskopických a cytometrických technik [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2019.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Chemie pro medicínské aplikace
Comittee
prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)
prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
prof. Ing. Michal Veselý, CSc. (člen)
prof. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr. (člen)
Date of acceptance
2019-06-10
Defence
Student prezentoval řešenou práci, její teoretická východiska a vlastní výsledky, zodpověděl dotazy položené oponentem a následně byly poleženy dotazy členů komise. Veselý: Prosím vysvětlení vztahu mezi tvarem histogramu z cytometrického měření a obsahem granulí PHA.Jaký je princip fluorescenčního mikroskopu? Co to je „dvoubarevné zrcadlo“?Pekař: Kdo a kde pořídil SEM snímky?Márová: Podle čeho byly voleny použité kmeny MO? Student prokázal velmi dobrou orientaci v dané problematice a schopnost samostatné prezentace získaných výsledků.
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení