Identifikace probiotických laktobacilů v mléčných výrobcích

Abstract

Bakterie rodu Lactobacillus jsou součástí střevní mikroflóry, jejíž složení ovlivňuje zdravotní stav hostitele. Vzhledem k tomu, že u některých druhů Lactobacillus byly prokázány klinické účinky (např. posílení imunitního systému, prevence průjmových onemocnění a další), jsou laktobacily často používány k přípravě fermentovaných mléčných výrobků nebo farmakologických preparátů. Pro identifikaci bakterií rodu Lactobacillus v mléčných výrobcích byla vyvinuta metoda PCR, která je založena na amplifikaci fragmentu DNA představující oblast mezi geny kódující 16S a 23S rRNA. Celková DNA izolovaná metodou fenolovou extrakce z výrobku Actimel Natur byla v této práci amplifikována rodově specifickou PCR. Detekcí specifického PCR produktu byla prokázána přítomnost bakterií rodu Lactobacillus ve výrobku. Provedením druhově specifické PCR byla ve výrobku Actimel Natur detekována přítomnost probiotického druhu Lactobacillus casei (ve výrobku Actimel Natur) v množství, které se přibližně shodovalo s deklarovaným údajem.The genus Lactobacillus is part of intestinal microbiota which constitution plays important role in health and well-being of the host. Probiotic properties of lactobacili have been studied in lot of studies and clinical effects (immune enhancement, prevention of diarrhoeal disease etc.) of some probiotic species have been documented. Therefore bacteria of genus Lactobacillus are used in the production of fermented dairy products and probiotic preparations. PCR method based on amplification of 16S – 23S rRNA intergenic spacer regions was developed for identification of Lactobacillus species presented in dairy products. Whole DNA obtained by phenol extraction from dairy product Actimel Natur was used in this work as template for PCR. Purified DNA was amplificated by genus-specific PCR. Bacteria of genus Lactobacilllus were detected due to the detection of specific PCR product. Using species-specific PCR probiotic species Lactobacillus casei was detected in the Actimel Natur in quantity that approximately corresponded to declared amounts.