Příprava a charakterizace cílených mRNA/DNA transfekčních nanovektorů

Simple item page
but.committeedoc. Ing. Jana Kolářová, Ph.D. (předseda) Ing. Martin Mézl, Ph.D. (místopředseda) Mgr. Bc. Darina Čejková, Ph.D. (člen) Ing. Vratislav Čmiel, Ph.D. (člen) Ing. Jakub Hejč (člen)cs
but.defenceStudent prezentoval výsledky své práce a komise byla seznámena s posudky. Ing. Čmiel položil otázku: Jaké bylo rozlišení mikroskopických snímků? Jak byla vyhodnocena úspěšnost transfekce? Rozlišoval jste velikosti oblastí fluorescence? Mgr. Čejková položila otázku: Které inzerty měly být exprimovány v buňkách? Jaká je cena genové terapie? Má uplatnění v ČR? Student obhájil diplomovou práci s výhradami a odpověděl na otázky členů komise.cs
but.jazykčeština (Czech)
but.programBiomedicínské inženýrství a bioinformatikacs
but.resultpráce byla úspěšně obhájenacs
dc.contributor.advisorSkopalík, Josefcs
dc.contributor.authorHorák, Tomášcs
dc.contributor.refereeChmelíková, Larisacs
dc.date.accessioned2023-08-25T22:54:52Z
dc.date.available2023-08-26cs
dc.date.available2023-08-25T22:54:52Z
dc.date.created2020cs
dc.description.abstractTato diplomová práce se zabývá genetickým inženýrstvím, zejména transfekcí DNA do MSC (Mesenchymal stromal cells) a dendritických buněk. Pro vnesení vektoru do buněk byly odzkoušeny jak lipoplexy, tak kovové magnetické nanočástice. Zkoumání bylo zaměřeno na nalezení účinnějších metod transfekce. Dle analýzy na MADLS a gelové elektroforéze byly zjištěny aspekty hrající důležitou roli při konjugaci a následné transfekci. Konjugace nastává již po 4 minutách, jak dokládá nárůst zeta-potenciálu, avšak pro dosáhnutí plné konjugace je potřeba inkubovat vzorek 20 min. Při neúplné konjugaci na železité nanočástice docházelo k výskytu silných interakcí nosič-nosič, a tím tvoření nežádoucích slepenců. Enkapsulace do lipozómů s kationickou úpravou povrchu proběhla bez komplikací. Úspěšnost exprese proteinu značeného GFP po transfekci těmito metodami byla vyčíslena na 95%, resp. 91%. Tento výsledek je připisován malé cytotoxicitě. Komerční otestované kity na dendritických buňkách však měli úspěšnost pod 5% s vysokou cytotoxicitou.cs
dc.description.abstractThis diploma thesis deals with genetic engineering, especially the transfection of DNA into MSCs (Mesenchymal stromal cells) and dendritic cells. Both lipoplexes and metal magnetic nanoparticles were tested to introduce the vector into cells. The research was focused on finding more efficient methods of transfection. According to analysis on MADLS and gel electrophoresis, aspects playing an important role in conjugation and subsequent transfection were found. Conjugation occurs after only 4 minutes, as evidenced by an increase in zeta potential, but to achieve full conjugation it is necessary to incubate the sample for 20 minutes. Incomplete conjugation to iron nanoparticles resulted in strong carrier-carrier interactions, which formed an unwanted conglomerates. Encapsulation into liposomes with cationic surface treatment was without complications. The success rate of GFP-labeled protein expression after transfection by these methods was calculated to be 95%, resp. 91%. This result is due to low cytotoxicity. However, commercial tested kits on dendritic cells had a success rate below 5% with high cytotoxicity.en
dc.description.markCcs
dc.identifier.citationHORÁK, T. Příprava a charakterizace cílených mRNA/DNA transfekčních nanovektorů [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta elektrotechniky a komunikačních technologií. 2020.cs
dc.identifier.other128855cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/213807
dc.language.isocscs
dc.publisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta elektrotechniky a komunikačních technologiícs
dc.rightsPřístup k plnému textu prostřednictvím internetu byl licenční smlouvou omezen na dobu 3 roku/letcs
dc.subjectLipozomcs
dc.subjecttransfekcecs
dc.subjectDNAcs
dc.subjectfosfolipidcs
dc.subjectmRNAcs
dc.subjectnanocs
dc.subjectvektorcs
dc.subjectMSCcs
dc.subjectdendritické buňkycs
dc.subjectgenetické inženýrstvícs
dc.subjectLiposomeen
dc.subjecttransfectionen
dc.subjectDNAen
dc.subjectphospholipiden
dc.subjectmRNAen
dc.subjectnanoen
dc.subjectvectoren
dc.subjectMSCen
dc.subjectdendritic cellsen
dc.subjectgenetic engineeringen
dc.titlePříprava a charakterizace cílených mRNA/DNA transfekčních nanovektorůcs
dc.title.alternativePreparation and characterisation of mRNA/DNA transfection vectorsen
dc.typeTextcs
dc.type.drivermasterThesisen
dc.type.evskpdiplomová prácecs
dcterms.dateAccepted2020-08-26cs
dcterms.modified2020-08-27-12:17:47cs
eprints.affiliatedInstitution.facultyFakulta elektrotechniky a komunikačních technologiícs
sync.item.dbid128855en
sync.item.dbtypeZPen
sync.item.insts2023.08.26 00:54:52en
sync.item.modts2023.08.26 00:12:52en
thesis.disciplinebez specializacecs
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Fakulta elektrotechniky a komunikačních technologií. Ústav biomedicínského inženýrstvícs
thesis.levelInženýrskýcs
thesis.nameIng.cs
Files
Original bundle
Now showing 1 - 3 of 3
Thumbnail Image
Name:
final-thesis.pdf
Size:
3.84 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
final-thesis.pdf
Download
Thumbnail Image
Name:
appendix-1.zip
Size:
95.58 KB
Format:
zip
Description:
appendix-1.zip
Download
Thumbnail Image
Name:
review_128855.html
Size:
6.1 KB
Format:
Hypertext Markup Language
Description:
review_128855.html
Download
Collections
2020