Interakce extraktů z kvasinek a mikrořas s buněčnými kulturami
Loading...
Date
Authors
Serikbay, Adilkhan
ORCID
Advisor
Referee
Mark
B
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Cílem bakalářské práce bylo získávání aktivních látek z mikrobiálních zdrojů, za účelem jejich charakterizace a testování cytotoxicity na buněčné linii HaCaT. V rámci charakterizace byly extrakty analyzovány spektrofotometricky. Na konci byl vliv extraktů na buněčné linie HaCaT zkoumán pomocí MTT testu. V teoretické části byla provedena literární rešerše zaměřená na buněčné kultury, kultivaci lidských buněk a testování cytotoxicity. V praktické části byly používány metody extrakce aktivních látek z Chlorella vulgaris a Rhodotorula toruloides. Extrakty byly analyzovány vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií a na základě výsledků byly v extraktech identifikovány aktivní látky, jako jsou ubichinon, ergosterol, torularhodin, lykopen, lutein a chlorofyly. Biokompatibilita optimalizovaných extraktů vybraných kmenů byla ověřena MTT testem na buněčné linii HaCaT. Extrakty mikrořas Chlorella vulgaris nebyly pro buněčnou linii HaCaT toxické, s mírou životaschopnosti přesahující 85 %. U testování kvasinky Rhodotorula toruloides na začátku vykazovaly buňky linie HaCaT vyšší míru životaschopnosti, která však s rostoucí koncentrací extraktu z kvasinky klesala.
The objective of this bachelor thesis was to optimize the extracting of bioactive compounds from microorganisms for the purpose of characterizing and evaluating their cytotoxicity on human cell line HaCaT. During the characterization phase, extract samples were analyzed using spectrophotometric techniques. After exposing the cell line to selected extracts, a cytotoxicity test was performed to assess cell viability using MTT analysis. The theoretical part encompassed an extensive literature review focused on cultivation techniques, human cell lines, cytotoxicity analysis, and viability assessments. The practical section provided a detailed exploration of contemporary extraction techniques utilizing a wide range of both polar and non-polar solvents to enhance the efficiency of extracting active compounds from the yeast strain Rhodotorula toruloides and microalgae Chlorella vulgaris. Active compounds such as ubiquinone, ergosterol, lycopene, and torularhodin were identified in the yeast, while the microalgae were found to contain lutein, chlorophylls, as confirmed by HPLC analysis. The biocompatibility of the optimized extracts from selected strains was verified using the MTT assay on HaCaT cell lines. The aqueous extract from microalgae Chlorella vulgaris exhibited lower toxicity to HaCat cell line, with viability rates exceeding 85%. Yeast extracts from Rhodotorula toruloides initially showed higher viability rates, which, however, decreased with increasing extract concentrations.
The objective of this bachelor thesis was to optimize the extracting of bioactive compounds from microorganisms for the purpose of characterizing and evaluating their cytotoxicity on human cell line HaCaT. During the characterization phase, extract samples were analyzed using spectrophotometric techniques. After exposing the cell line to selected extracts, a cytotoxicity test was performed to assess cell viability using MTT analysis. The theoretical part encompassed an extensive literature review focused on cultivation techniques, human cell lines, cytotoxicity analysis, and viability assessments. The practical section provided a detailed exploration of contemporary extraction techniques utilizing a wide range of both polar and non-polar solvents to enhance the efficiency of extracting active compounds from the yeast strain Rhodotorula toruloides and microalgae Chlorella vulgaris. Active compounds such as ubiquinone, ergosterol, lycopene, and torularhodin were identified in the yeast, while the microalgae were found to contain lutein, chlorophylls, as confirmed by HPLC analysis. The biocompatibility of the optimized extracts from selected strains was verified using the MTT assay on HaCaT cell lines. The aqueous extract from microalgae Chlorella vulgaris exhibited lower toxicity to HaCat cell line, with viability rates exceeding 85%. Yeast extracts from Rhodotorula toruloides initially showed higher viability rates, which, however, decreased with increasing extract concentrations.
Description
Citation
SERIKBAY, A. Interakce extraktů z kvasinek a mikrořas s buněčnými kulturami [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2024.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
bez specializace
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda)
doc. Ing. Filip Mravec, Ph.D. (místopředseda)
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
doc. RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Eva Vítová, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2024-06-11
Defence
1. Student seznámil členy komise s náplní a cílem bakalářské práce.
2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci.
3. Student akceptoval všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděl v plné šíři.
Diskuse:
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D.
U testování viability jste v grafu měl uvedený 50 % ethanol, jaká byla výsledná koncentrace pro buňky? Jak byla stanovována viabilita buněk?
doc. RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D.
Zmínil jste, že jste v práci stanovoval bioaktivní látky, o které se přesně jednalo?
Student odpověděl na všechny doplňující otázky členů komise, které byly v průběhu diskuse k dané problematice vzneseny. Student prokázal velmi dobré odborné znalosti i schopnost samostatné prezentace dosažených výsledků.
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení