Uvolňování solubilizovaných látek z fázově separovaných hydrogelů

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá uvolňováním solubilizovaných látek z fázově separovaných hydrogelů. Cílem práce je stanovit jejich solubilizační kapacitu. Hydrogely byly připraveny na základě interakce záporně nabitého polymeru (hyaluronan) a kladně nabitého tenzidu (Septonex) a byly připraveny dvěma možnými způsoby, tzv. „mokrou“ a „suchou cestou“. K solubilizačním experimentům byl použit fluorescein a akridinová oranž, jakožto fluorescenční sondy. K určení, zda se z hydrogelu dané látky uvolňují nebo ne, byla primárně použita metoda UV-VIS spektrofotometrie, kdy jednotlivá měření probíhala po 24, 48 a 72 hodinách od doby jejich přípravy. Tato metoda se ale později ukázala jako nevhodná a nepřesná z důvodů vzniku zakalených supernatantů nad vzniklými gely a nízkých koncentrací fluorescenčních sond v tomto roztoku. Z těchto důvodů byla zvolena metoda měření na základě fluorescence těchto sond pomocí přístroje MicroTime 200. Jedná se o velice přesný přístroj, proto výsledky z tohoto měření byly brány jako relevantní. Výsledky byly shrnuty na základě použití fluorescenčních sond, kdy bylo prokázáno, že fluorescein jako záporně nabitá molekula se uvolňuje podstatně méně než akridinová oranž.This bachelor thesis is focused on releasing of the solubilized substances from the phase separeted hydrogels. The aim of this work is to determine the solubilization capacity of these hydrogels. Preparation of them were based on interaction between hyaluronan and cationic surfactant carbethopendecinium bromide. Hydrogels were prepared by two possible ways, „wet“ and „dry way“. For solubilization experiments were used fluorescein and acridine orange as fluorescent probes. Primarily UV-VIS spectrophotometry was used to determine if these probes are released form hydrogel or not. Hydrogels were monitored after 24, 48 and 72 hours from their preparation. But this method proved to be inappropriate and inaccurate, because of cloudy supernatants over the hydrogels and also because of very low concentrations of fluorescent probe in this solution. For these reasons instead of this metod was used method, which is based on fluorescence. The instrument is called MicroTime 200. It´s very accurate method and results of this are considered like relevant. It was proved that fluorescein as a negatively charged molecule is released less than acridine orange.