Aplikace vybraných metod k analýze oxidačního stresu

Abstract

Chronická pankreatitida (CHP) je progresivní onemocnění charakteristické chronickým zánětem pankreatické tkáně, který má různou etiologii. Oxidační stres, který je provázen zánětlivými procesy, se jeví jako velmi významný faktor přispívající k rozvoji chronické pankreatitidy. Cílem této práce bylo stanovit hladiny produktů lipidové peroxidace malondialdehydu (MDA) a 4-hydroxynonenalu (4-HNE), společně s nitrity, antioxidační kapacitou, pro- a protizánětlivými cytokiny, biochemickými a hematologickými parametry v plazmě pacientů s chronickou pankreatitidou a v plazmě kontrolních jedinců. Plazmatické hladiny MDA a 4-HNE byly stanoveny vysoceúčinnou kapalinovou chromatografií. Celková antioxidační kapacita plazmy vůči peroxylovému radikálu byla stanovena chemiluminiscenční metodou. Nitrity byly stanoveny za použití Griessovy reakce. Zánětlivé cytokiny - TNF-alfa; TNF RI; PDGF-AB; TGF-beta, společně s myeloperoxidázou a hyaluronanem byly stanoveny za použití ELISA metody. V plné krvi byly pak stanoveny také biochemické a hematologické parametry standardními metodami.Chronic pancreatitis (CP) is a heterogeneous disease defined as chronic inflammatory changes of the pancreatic tissue caused by variety of aetiologies. Oxidative stress accompanying the inflammatory processes has been suggested as an important factor contributing to CP development. The aim of this study was to determine levels of lipid peroxidation products malondialdehyde (MDA) and 4-hydroxynonenal (4-HNE), together with nitrites, the total antioxidant capacity, cytokines, biochemical and haematological parameters in the plasma of patients with CP and control subjects. Levels of MDA and 4-HNE were analyzed using high-performance liquid chromatography. The total antioxidant capacity of plasma against peroxyl radicals was evaluated using chemiluminescence determination. Nitrites were determined using Griess reaction. Cytokines - TNF-alfa; TNF RI; PDGF-AB; TGF-beta, together with myeloperoxidase and hyaluronan were determined using ELISA Kits. Biochemical and haematological parameters were measured by standard methods.