Měření konformačních vlastností nukleových kyselin

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá charakteristikou nejvýznamějších konformací nukleových kyselin. Kromě klasické B-DNA šroubovice popisuje i alternativní konformace A-DNA, Z-DNA, triplexu, nebo také guaninového, či cytozinového kvadruplexu. Dále je zde uveden přehled nejrozšířenějších metod používaných pro určení konkrétní konformace. Mezi metody uvedené v práci patří nukleární magnetická rezonance (NMR), metoda cirkulárního dichroismu (CD), rentgenová krystalografie, výpočetní metody, absorpční spektrofotometrie a její využití při analýze křivek tání. V prostředí MATLAB byl vytvořen algoritmus s grafickým uživatelským rozhraním pro analýzu křivek tání, který uživateli poskytuje termodynamické parametry, jako je mezní teplota a entalpie, určující stabilitu zkoumaného vzorku.This thesis gives a brief characteristic of the most important conformations of nucleic acids. It describes alternative conformations that are different from canonical B-DNA helix, such as A-DNA, Z-DNA, triplex structures, or guanine and cytozin quadruplex structures. In the next part it presents most common methods used for determing secondary structure of nucleic acids, which are nuclear magnetic resonance (NMR), measurement of circular dichroism (CD), X-ray diffraction, computational methods, measurements of ultraviolet absorbance and its utilization for analysis of thermal melting curves. In MATLAB was created algorithm with graphical user interface, which analyze melting curves and graphically computes thermodynamic parameters, which are melting temperature and transition enthalpy, which defines stability of examined sample.