Optimalizace metod izolace a analýzy beta-glukanů produkovaných karotenogenními kvasinkami
Loading...
Date
Authors
Šimková, Eva
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Cílem této diplomové práce byla optimalizace metod izolace a analýzy polysacharidů -glukanů produkovaných karotenogenními kvasinkami. V rámci experimentu byla vybrána jako produkční kmen kvasinka Rhodotorula toruloides, která byla kultivována v laboratorních bioreaktorech. V teoretické části je vypracována literární rešerše na téma karotenogenní kvasinky a metabolity, které produkují. Hlavním metabolitem, kterým se tato práce zabývá, je polysacharid -glukan. -glukany jsou polysacharidy, které tvoří v buňce kvasinky buněčnou stěnu. Jsou známy pro své imunostimulační účinky, antioxidační účinky, podporují hojení ran a pomáhají ke snížení hladiny cholesterolu a glukózy v krvi. Experimentální část práce se zabývá kultivací kvasinkové biomasy, její charakterizací. Dále optimalizací enzymatického stanovení -glukanů pomocí komerčního enzymatického kitu a izolacemi -glukanů z kvasinkové biomasy. V rámci experimentu byly také dále vyvíjeny metody extrakce kvasinkové biomasy umožňující z malého vzorku kvasinkové biomasy jedním extrakčním postupem vyseparovat a analyzovat -glukany, lipidy, lipidické látky a proteiny.
The aim of this thesis was to optimize the methods of isolation and analysis of -glucan polysaccharides produced by carotenogenic yeasts. As part of the experiment, the yeast Rhodotorula toruloides, which was cultivated in laboratory bioreactors, was selected as the production strain. Theoretical part describes the subject of carotenogenic yeasts and the metabolites they produce. The main metabolite that this work deals with is the polysaccharide -glucan. -glucans are polysaccharides that form the cell wall in the yeast cell. They are known for their immunostimulating effects, antioxidant effects, promote wound healing and help lower cholesterol and blood glucose levels. The experimental part of the work deals with the cultivation of yeast biomass and its characterization. Furthermore, optimization of the enzymatic determination of -glucans using a commercial enzymatic kit and isolation of -glucans from yeast biomass. As part of the experiment, yeast biomass extraction methods were also further developed, enabling the separation and analysis of -glucans, lipids, lipidic substances and proteins from a small sample of yeast biomass in one extraction procedure.
The aim of this thesis was to optimize the methods of isolation and analysis of -glucan polysaccharides produced by carotenogenic yeasts. As part of the experiment, the yeast Rhodotorula toruloides, which was cultivated in laboratory bioreactors, was selected as the production strain. Theoretical part describes the subject of carotenogenic yeasts and the metabolites they produce. The main metabolite that this work deals with is the polysaccharide -glucan. -glucans are polysaccharides that form the cell wall in the yeast cell. They are known for their immunostimulating effects, antioxidant effects, promote wound healing and help lower cholesterol and blood glucose levels. The experimental part of the work deals with the cultivation of yeast biomass and its characterization. Furthermore, optimization of the enzymatic determination of -glucans using a commercial enzymatic kit and isolation of -glucans from yeast biomass. As part of the experiment, yeast biomass extraction methods were also further developed, enabling the separation and analysis of -glucans, lipids, lipidic substances and proteins from a small sample of yeast biomass in one extraction procedure.
Description
Citation
ŠIMKOVÁ, E. Optimalizace metod izolace a analýzy beta-glukanů produkovaných karotenogenními kvasinkami [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2023.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
bez specializace
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda)
prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (místopředseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D. (člen)
doc. RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Eva Vítová, Ph.D. (člen)
prof. Ing. Stanislav Kráčmar, DrSc. (člen)
Date of acceptance
2023-05-30
Defence
1. Studentka seznámila členy komise s náplní a cílem diplomové práce.
2. Byly přečteny posudky na diplomovou práci.
3. Studentka akceptovala všechny připomínky oponentky a na všechny otázky odpověděla v plné šíři.
Diskuse:
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D.
V práci používáte nevhodnou terminologii, jaký je rozdíl mezi izolovaným produktem a vyizolovaným? Také co se týká vzorků, tak vzorky se stanovují nebo analyzují?
V práci se také zabýváte optimalizací a snížením ceny kitu pro stanovení beta glukanů, můžete to prosím objasnit? V rámci optimalizace jste nahradila centrifugaci stříkačkovými filtry, je to ekonomicky výhodnější? Proč jste se tento krok rozhodli zavést?
prof. Mgr. Václav Brázda, Ph.D.
V práci na obrázcích uvádíte kultury po kultivace, které jsou krásně oranžově zbarvené, je možné tyto kvasinky použít přímo do potravin jako barvivo?
Studentka odpověděla na všechny doplňující otázky členů komise, které byly v průběhu diskuse k dané problematice vzneseny. V diskusi studentka prokázala výbornou orientaci v dané problematice. Po diskusi následovalo hodnocení závěrečné práce. Diplomantka prokázala nejen výborné odborné znalosti, ale i schopnost samostatné prezentace dosažených výsledků.
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení