Spojení mikro-elektromembránové extrakce s transientní kapilární izotachoforézou pro analýzu léčiv v biologicklých vzorcích
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Diplomová práca je zameraná na vývoj inštrumentálneho usporiadania in line prepojenia mikroelektromembránovej extrakcie (EME) s kapilárnou elektroforézou (CE) pre analýzy vybraných liečiv v telových tekutinách. Doteraz bolo publikované priame spojenie EME a CE len pre analýzu riečnej vody [1]. Byť publikované spojenie bolo realizované v rámci komerčnej CE, naráža na niekoľko úskalí, ktoré môžu mať negatívny dopad na analýzy vzoriek s komplexnou matricou. Usporiadanie prezentované v tejto diplomovej práci tieto nedostatky eliminuje a otvára tak možnosti rozšíriť aplikácie EME-CE prepojenia aj na vzorky s komplexnou biologickou matricou. Jadrom experimentálnej časti je optimalizácia základných extrakčných a separačných podmienok pre stanovenie vybraných modelových bázických liečiv (nortriptylinu, haloperidolu a loperamidu) s využitím tranzientnej izotachoforézy (tITP). Extrakčné podmienky boli optimalizované pre prenos analytov z komplexnej matrice (ľudská moč) cez voľnú kvapalnú membránu (FLM) s priamym dávkovaním elektrokinetickým superchargingom (EKS) do kapiláry CE systému. Následne optimalizované podmienky boli aplikované na krv vo forme suchých krvných bodiek, ktorá je z pohľadu súčasných analytických trendov pre sledovanie koncentrácie liečiv v krvi zaujímavá. Reprodukovateľnosť meraní bola
The diploma thesis is focused on the development of in-line micro-electromembrane extraction (EME) coupled to capillary electrophoresis (CE) for the analysis of selected drugs in body fluids. Up to now, direct coupling of EME to CE has been demonstrated on diluted river samples only [1]. Although the published set-up has been implemented within a commercial CE it suffers from several drawbacks that can have a negative impact on the analysis of samples with higher complexity. The instrumental arrangement presented in this thesis eliminates these deficiencies. The experimental part is based on the optimization of fundamental extraction and separation conditions for the analysis of model basic drugs (nortriptyline, haloperidol, loperamide) with the use of transient isotachophoresis (tITP) principle. The extraction conditions were optimized for electro-driven transport of basic analytes from complex matrices (urine) through free liquid membrane followed by injection step utilized by electrokinetic supercharging (EKS), which focused target analytes into the CE capillary. Optimized conditions have been applied on blood in the form of dry blood spots, which are highly attractive samples in the current clinical analysis. The repeatability of the measurements was
The diploma thesis is focused on the development of in-line micro-electromembrane extraction (EME) coupled to capillary electrophoresis (CE) for the analysis of selected drugs in body fluids. Up to now, direct coupling of EME to CE has been demonstrated on diluted river samples only [1]. Although the published set-up has been implemented within a commercial CE it suffers from several drawbacks that can have a negative impact on the analysis of samples with higher complexity. The instrumental arrangement presented in this thesis eliminates these deficiencies. The experimental part is based on the optimization of fundamental extraction and separation conditions for the analysis of model basic drugs (nortriptyline, haloperidol, loperamide) with the use of transient isotachophoresis (tITP) principle. The extraction conditions were optimized for electro-driven transport of basic analytes from complex matrices (urine) through free liquid membrane followed by injection step utilized by electrokinetic supercharging (EKS), which focused target analytes into the CE capillary. Optimized conditions have been applied on blood in the form of dry blood spots, which are highly attractive samples in the current clinical analysis. The repeatability of the measurements was
Description
Keywords
Kapilárna elektroforéza, mikro elektromembránova extrakcia, voľná kvapalná membrána, tranzientná izotachoforéza, elektrokinetický supercharging, komplexné biologické vzorky, bázické liečivá., Capillary electrophoresis, micro-electro membrane extraction, free liquid membrane, transient isotachophoresis, electrokinetic supercharging, complex biological samples, basic drugs.
Citation
LUČAJ, M. Spojení mikro-elektromembránové extrakce s transientní kapilární izotachoforézou pro analýzu léčiv v biologicklých vzorcích [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2020.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
sk
Study field
Chemie pro medicínské aplikace
Comittee
prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
prof. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr. (člen)
Date of acceptance
2020-06-29
Defence
Obhajoba diplomové práce proběhla podle následujícího schématu: prezentace studenta-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Student přednesl výborný výtah výsledků své práce, řádně zodpověděl všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagoval na připomínky. V diskusi tak student prokázal výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky práce. Komise zhodnotila jeho práci celkově jako výbornou.
Márová: Odkud pocházely vzorky krve a moči? Byla metoda validována na reálných biologických vzorcích? Odpovídají koncentrace analytů reálným vzorkům?
Jaký byl rozměr vzorků suché kapky krve?
Jak byste validovali vaši metodu?
Obruča: Jaký vliv by měla zvýšená bazicita akceptorového roztoku?
Zdráhal: Máte představu o detekčním limitu vámi studované metody? Jaké je reprodukovatelnost?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení