Inovační přístupy ke stabilizaci RNA molekul v nanočásticích pro biomedicínské aplikace

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá studiem enkapsulace nukleových kyselin do liposomálních částic připravovaných metodou ultrazvukové sonifikace. Nukleové kyseliny, jako jsou DNA a RNA, představují významné biomolekuly s širokým uplatněním v oblasti biomedicíny, zejména při vývoji nových terapeutických a diagnostických metod. Jejich praktické využití je však limitováno nízkou stabilitou v biologickém prostředí, kde podléhají rychlé degradaci. Jednou z efektivních strategií ochrany těchto molekul je jejich enkapsulace do nanonosičů, jako jsou například liposomy. Cílem této práce byla optimalizace metody přípravy liposomálních částic s enkapsulovanou plazmidovou DNA a syntetickými oligonukleotidy a následné hodnocení jejich enkapsulační účinnosti a stability. V rámci optimalizace byly v experimentální části připraveny liposomy s různým poměrem lecitinu a cholesterolu, do nichž byly následně enkapsulovány nukleové kyseliny. Pro charakterizaci připravených částic byla využita metoda dynamického rozptylu světla (určení velikosti a polydisperzity částic) a měření zeta potenciálu (posouzení jejich stability). Enkapsulační účinnost byla hodnocena pomocí horizontální elektroforézy. Za nejvýznamnější výsledek této práce lze považovat optimalizaci přípravy liposomů při menším reakčním objemu a dosažení vysoké enkapsulační účinnosti u komerčně dodaných syntetických nukleotidů, zatímco u plazmidové DNA byla účinnost nižší, zejména při vyšších koncentracích. Tyto poznatky poskytují pevný základ pro další úpravy těchto systémů směrem k jejich využití v biomedicínských aplikacích.

liposomes, encapsulation, nucleic acids, plasmid DNA, oligonucleotides, ultrasonic sonication, encapsulation efficiency, nanocarriers, dynamic light scattering, zeta potential, stability, biomedical applications