ROUBALOVÁ, M. Studium metabolismu karotenogenních kvasinek na molekulární úrovni. [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2017.
Předložená diplomová práce je zaměřena na využití molekulárních metod a UV mutageneze k přípravě a charakterizaci kmenů kvasinek schopných nadprodukce karotenoidů a lipidů, a to s využitím odpadních substrátů. K řešení problematiky bylo nutné zvládnout neobvykle široký rozsah metod od kultivačních technik, stanovení růstových charakteristik mikroorganismů přes instrumentální chromatografické metody (GC, HPLC) pro stanovení metabolitů až po náročné molekulární techniky k izolaci, charakterizaci a aplifikaci DNA a metody mutageneze. Diplomantka zvládla rozsáhlou a metodicky mimořádně náročnou práci s vysokou mírou samostatnosti i tvůrčího přístupu. Je třeba ocenit i mimořádný zájem diplomantky o řešené téma a ochotu i schopnost inovovat či modifikovat zavedené postupy. Rozsah provedených experimentů vysoce překračuje obvyklou míru typickou pro podobný typ závěrečných prací. Diplomatka prokázala nejen značné odborné schopnosti, ale i laboratorní dovednosti. Výsledkem je zdařilá diplomová práce, jejíž výsledky byly již prezentovány na mezinárodní konferenci. Výstupy jsou kvalitním základem pro navazující práce i potenciální aplikační výstupy. Plně doporučuji práci k obhajobě a hodnotím ji výslednou známkou "výborně" (A).
| Kritérium | Známka | Body | Slovní hodnocení |
|---|---|---|---|
| Splnění požadavků zadání | A | ||
| Studium literatury a její zpracování | A | ||
| Využití poznatků z literatury | A | ||
| Kvalita zpracování výsledků | A | ||
| Interpretace výsledků, jejich diskuse | B | ||
| Závěry práce a jejich formulace | A | ||
| Využívání konzultací při řešení práce | A | ||
| Celkový přístup k řešení úkolů | A |
Předložená práce Bc. Moniky Roubalové je zaměřena na studium metabolismu karotenogenních kvasinek na molekulární úrovni. Pro potřeby splnění cílů diplomové práce musela autorka zpracovat rozsáhlou literární rešerši, zaměřenou především na kvasinky, jejich metabolismus a produkční vlastnosti. Dále také na vliv stresového prostředí, především však působení mutagenů na případnou nadprodukci metabolitů a v neposlední řade také na samotné taxonomické zařazení kvasinek. Zvláštní pozornost v práci je věnována metodám molekulární charakterizaci karotenogenních kvasinek. V praktické části práce musela autorka zvládnout celou řadou postupů a metod, přes kultivační metody, analytické stanovení vybraných metabolitů či komponentů v kultivačních médiích až po složitější molekulární techniky. Práce je sepsána klasickým způsobem členění na 80 stranách. Autorka využila celkem 76 literárních zdrojů, které dostatečným způsobem uvedly čitatele do problematiky. Výsledky a diskuse jsou zpracovány do třech na sebe navazujících kapitol. V průběhu řešení bylo zpracováno množství dílčích experimentů, pomocí růstových charakteristik a morfologických znaků byly hodnoceny změny produkce biomasy a sledovaných metabolitů. Komplexní metabolické změny byly posuzovány prostřednictvím PCR a denaturační gradientové gelové elektroforézy. Veškeré výsledky jsou zpracovány formou tabulek a grafů, mnohdy však nejsou dostatečně popsány, co snižuje přehlednost práce. Například graf č.13: produkce metabolitů u produkčních kmenů – chybí uveden použitý substrát. Ve výsledkové části práce se často nacházejí principy využitých metod místo obsáhlejší diskuze získaných dat. Komentáře jsou někdy až příliš stručné. V práci je také uváděn obsah jednotlivých produkcí (karotenoidů, lipidických metabolitů) avšak bez využití základních statistických metod – například chybí směrodatné odchylky. Závěrem mohu říci, že výsledky předložené práce představují cennou základnu pro další navazující práce týkající se molekulární charakterizací karotenogenních kvasinek a selekcí nadprodukčních kmenů s využitím odpadních substrátů. Práci doporučuji k obhajobě a hodnotím výborně (A).
| Kritérium | Známka | Body | Slovní hodnocení |
|---|---|---|---|
| Splnění požadavků zadání | A | ||
| Logické členění práce | A | ||
| Kvalita zpracování výsledků | B | ||
| Interpretace výsledků, jejich diskuse | B | ||
| Využití literatury a její citace | A | ||
| Úroveň jazykového zpracování | A | ||
| Formální úroveň práce – celkový dojem | A | ||
| Závěry práce a jejich formulace | B |
eVSKP id 99319