Posudky závěrečné kvalifikační práce

Posudek vedoucího

Márová, Ivana

Bakalářská práce je zaměřena na srovnání složení a biologických vlastností mikrobiálních olejů izolovaných z několika kmenů karotenogenních kvasinek. Studentka přistupovala k řešení zadaného tématu s velkým zájmem, iniciativně a téma sama rozvíjela, zejména v oblasti potenciálních aplikací v kosmetice a potravinářství. Časově vysoce náročná práce vyžadovala zvládnutí velkého rozsahu různých experimentálních technik od kultivace kvasinek a stanovení růstových charakteristik přes extrakce, plynovou a kapalinovou chromatografii a spektrofotometrické techniky. Součástí práce byly i antimikrobiální testy, testy cytotoxicity a bezpečnosti na humánních buněčných liniích a stanovení SPF. Aplikačním výstupem byl kromě charakterizace složení a antioxidačních vlastností mikrobiáního oleje i návrh jeho využití v potravinářství a rovněž při přípravě vlastního kosmetického výrobku. Kvalita výrobku byla otestována na skupině dobrovolníků a byly vyhodnoceny účinky. Studentka projevila značnou samostatnost, laboratorní zručnost i organizační schopnosti při zvládnutí časově i metodicky náročné práce. Během práce aktivně využívala konzultace a pokusila se interpretovat obsáhlý soubor dat v souvilsostech a zformulovat odpovídající závěry. Získané výsledky zpracovala studentka do velmi kvalitní a rozsahem i obsahem nadstandardní bakalářské práce. Výsledky budou cenným základem a východiskem pro navazující studie i pro praktické aplikace. Vzhledem k výše uvedeným skutečnostem doporučuji práci k obhajobě a hodnotím celkovou známkou "výborně (A)".

Dílčí hodnocení
Kritérium	Známka	Body	Slovní hodnocení
Kvalita zpracování výsledků	A
Interpretace výsledků, jejich diskuse	B
Závěry práce a jejich formulace	A
Využívání konzultací při řešení práce	A
Celkový přístup k řešení úkolů	A
Splnění požadavků zadání	A
Studium literatury a její zpracování	A
Využití poznatků z literatury	A

Navrhovaná známka: A

Posudek oponenta

Szotkowski, Martin

Předložená bakalářská práce studentky Viktorie Požgayové se zabývá studiem využití extratů bioaktivních látek získaných extrakcí z karotenogenních kvasinek v potravinářství a kosmetice. V rozsáhlé teoretické části práce studentka popisuje mikrobiální oleje, kvasinky a jejich cytologií. Dále detailněji rozebírá oleogenní kvasinky. V druhé části jsou podrobně popsány všechny typy bioaktivních látek, které studentka v rámci experiment analyzovala a jejich možné využití v potravinářství a kosmetice. Závěrem jsou poté popsány použité analytické techniky. Experimentální část práce je nadmíru obsáhlá a obsahuje velké množství rozdílných technik začínajících kultivačními technikami karotenoidních kvasinek, extrakcí a analýzou získané biomasy. Následně byly prováděny stabilitní testy extraktů. Získané extrakty byly poté podrobeny antimikrobiálním testům, testům na lidských buněčných liniích a závěrem byly extrakty testovány v kosmetickém přípravku. K této rozsáhlé práci mám několik připomínek: V teoretické částí práce se objevují chybná/nepravdivá tvrzení: kap. 2.3 str. 12 Produkce luteinu karotenogenními kvasinkami. Kvasinky nemají enzymatickou výbavu schopnou syntetizovat lutein. Názvy kvasinkových rodů v kapitolách nejsou psány kurzívou – př. Str.12 Rod Rhodotorula V experimentální části jsou neúplné popisy použitých metod: Kapitola 4.10 není uvedeno, zda byla biomasa promyta destilovanou vodou, či jen zcentrifugována. Kapitola 4.11 není uvedeno kolik ml extraktu bylo připraveno, či jak proběhla kontrola odpaření veškerého objemu rozpouštědla (Ve výsledkové části práce jsou uvedeny různé směsi a kombinace rozpouštědel, např. DMSO s bodem varu 189°C). Tyto nedostatky nesnižují výrazně kvalitu práce a množství metod, které musela studentka zvládnout. Předloženou práci tedy doporučuji k obhajobě a hodnotím ji stupněm – A „výborně“.

Dílčí hodnocení
Kritérium	Známka	Body	Slovní hodnocení
Splnění požadavků zadání	A
Interpretace výsledků, jejich diskuse	C
Kvalita zpracování výsledků	B
Logické členění práce	A
Využití literatury a její citace	A
Úroveň jazykového zpracování	A
Závěry práce a jejich formulace	A
Formální úroveň práce – celkový dojem	A

Navrhovaná známka: A

Otázky

V kapitole 4.11.2 uvádíte, že k chemickému rozbití buněk dochází působením DMSO. Můžete tvrzení, že aplikace samotného DMSO na buňky kvasinek vede k rozbití jejich buněk doložit experimentálními daty, např. mikroskopické pozorování, barvení buněk či dostupným literárním zdrojem? Pokud ne, jak jinak DMSO působí na buňky kvasinek?
V práci uvádíte, že připravené extrakty z kvasinkové biomasy byly odpařeny přes noc v digestoři. Proč jste zvolili tuto metodu? Jaké jiné metody byste mohli využít pro odstranění nadbytku rozpouštědla s přihlédnutím k zachování nejvyšší možné stability bioaktivních látek obsažených ve Vašem extraktu?
Proč bylo pro studium stability extraktů využito spektrofotometrické stanovení obsahu karotenoidů. Může studentka uvézt i jiné metody, které by bylo možné využít pro tento experiment a srovnat pro a proti.
Čím si studentka vysvětluje rozdíly v naměřeném obsahu karotenoidů pomocí UV-VIS spektroskopie a HPLC?
V kapitole 5.3.4 studentka uvádí, že kvasinky mají menší antioxidační aktivitu než řasy. Mohla by studentka uvézt zdroj, dle kterého provedla srovnání mezi kvasinkami a řasami.
Může studentka blíže vysvětlit toto tvrzení ve výsledkové části? Je teda možné konštatovať, že pri lyofilizácii došlo ku zakoncentrovaniu biomasy a následne boli nižšie straty pri extrakciách. Z pohledu čtenáře toto tvrzení vyvolává domněnku, že v případě extrakcí nebylo použito ekvivalentní množství lyofylizované/nelyofylizované biomasy.