RYŠÁVKA, P. Tvorba biofilmu u probiotických kultur a možnosti jeho využití ve farmacii [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2021.
Mgr. Petr Ryšávka zahájil studium v doktorském studijním programu „Chemie a technologie potravin“, obor Potravinářská chemie v roce 2012. Celou dobu studuje v kombinované formě a práci předkládá k obhajobě v rámci řádné doby studia prodloužené z důvodu pandemie Covid-19. V dubnu 2021 předložil disertační práci na téma „Tvorba biofilmu u probiotických kultur a možnosti jeho využití ve farmacii “. Student řešil disertační práci v kombinované formě v rámci výzkumného programu společnosti "Pharmaceutical Biotechnology", jejímž je jednatelem. Část experimentů byla provedena ve specializovaných laboratořích ICRC FNUSA v Brně a také ve spolupráci s dalšími průmyslovými subjekty. Jedná se o práci s výrazně mezioborovým charakterem a vysokým podílem přímého uplatnění výsledků výzkumu v praxi. V rámci doktorského studia byly realizovány všechny plánované experimenty, doktorand splnil veškeré předepsané zkoušky a úspěšně složil státní doktorskou zkoušku. V průběhu studia absolvoval Mgr. Ryšávka řadu průmyslových stáží a byl řešitelem nebo spoluřešitelem několika projektů TAČR, MPO a do řady projektů průmyslového výzkumu. Odborné zaměřené Mgr. Ryšávky je orientováno na vývoj biofilmových probiotik a jejich uvedení do praxe a prodeje. V poslední době se věnuje zejména rozvoji originálních postupů pro přípravu personalizovaných probiotik. Preparát "Probion" byl uveden na trh a rovněž oceněn mezinárodní cenou za nejlepší biotechnologický produkt (Kevan Gartland´s Award, EBTNA, 2020). Dosažené výsledky byly prezentovány formou 2 přjatých patentů a 4 zapsaných užitných vzorů, dále 1 uveřejněné publikace v časopise s IF, a dalších 2 rukopisů v recenzním řízení, 1 kapitoly v knize a 7 konferenčních příspěvků na mezinárodních konferencích. Autor vystupoval aktivně formou popularizačních přednášek na odborných profesních konferencích, veletrzích a aktivně se podílel na uvedení vlastních vynálezů do průmyslové praxe. Obzvlášť je třeba ocenit patent CZ 308165 s názvem "Nosič určený ke kultivaci probiotických kultur, kompozice, která takovýto nosič obsahuje", který byl komercionalizován a uveden do výroby v roce 2018. Mgr. Ryšávka je komplexní flexibilní osobnost s jedinečnou schopností kombinovat předvídavost a tvůrčí přístup k výzkumu s bezprostředním uváděním výsledků přímo do praxe. Má řadu teoretických i praktických zkušeností v oblasti výzkumu, technologie zpracování a aplikace probiotických bakterií a jejich účinku na zdraví. V tomto směru si vybudoval dobré jméno v ČR i v zahraničí, kam rozšířil i své odborné a obchodní aktivity. Jeho výstupy a produkty jsou pravidelně prezentovány ve sdělovacích prostředcích pro širokou veřejnost i v profesním odborném tisku včetně rozšíření informací ohledně spolupráce s Fakultou chemickou. Získané výsledky zadaného tématu byly shrnuty ve zdařilé disertační práci, která dokumentuje komplexní a současně tvůrčí přístup k práci, vysokou odbornou úroveň a přehled Mgr. Ryšávky ve studované tématice včetně nesporné schopnosti uvádět produkty výzkumu do klinické a výživové praxe. Vzhledem k výše uvedeným skutečnostem a v souladu s platnou legislativou doporučuji, aby byla disertační práce přijata k obhajobě a po jejím úspěšném obhájení byla Mgr. Petru Ryšávkovi udělena vědecká hodnost Ph.D.
O p o n e n t s k ý p o s u d e k na dizertační práci RNDr. Petra Ryšávky „Tvorba biofilmu u probiotických kultur a možnosti jeho využití ve farmacii“. Školitel: Prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. Doktorský studijní program: Chemie a technologie potravin Dizertační práce RNDr. Petra Ryšávky si klade za cíl vytvořit nový probiotický preparát obsahující kmeny ve formě biofilmu na kombinovaném nosiči s prebiotickou složkou, která podpoří stabilitu biofilmu a finální životnost probiotických bakterií, s ověřením výhody biofilmové formy od formy planktonní u probiotických kmenů bakterií. Stanovené dílčí cíle jsou logickým rozfázováním kroků k dosažení hlavního cíle a spočívají ve vytipování a otestování vhodných adherentní probiotických kmenů pro tvorbu biofilmu; otestování různých variant nosičů pro kultivaci a navázání bakterií; otestování adherence a tvorby biofilmu, jeho stabilitu a odolnost u probiotických kmenů na různých typech nosičů včetně produkce antimikrobiálních látek; zavedení protokolu umožňujícího zjistit míru adherence probiotických bakterií na nosič pro srovnání kompatibility různých nosičů; optimalizace kultivace multidruhového biofilmu na kombinovaném nosiči; ověření vlivu konzumace jídla a nápojů spolu s užíváním probiotik a příprava individuálních probiotik na základě analýzy střevních bakterií ze vzorku stolice jedince a jeho anamnézy. Aktuálnost tématu dizertační práce je zejména z pohledu podpory a obnovy zdraví nesporná. Vlastní práce je zpracována na 107 stranách, s přílohami I, II, s 36 tabulkami a 24 obrázky. Doloženy jsou související publikační výstupy i podpůrné projekty. Rozsah a obsah práce odpovídají zadaným cílům. Práce je správně strukturována dle obvyklého schématu. Kapitola Literární přehled řešené problematiky cituje velkou řadu literárních pramenů a je proporcionálně zastoupená. Autor se snaží danou problematiku popsat z několika zorných úhlů, což se mu zdařilo. Nicméně větší uspořádanost by místy byla ku prospěchu přehlednosti (např. kapitola 3.3.1.). Naopak větší rozpracovanost by zasloužila kapitola Mikrobiota. Cíle práce jsou stanoveny logicky a srozumitelně. Experimentální část je řešena v souladu s aktuálními poznatky vědy. Materiál a metody jsou definovány jasně (místy, ne zcela homogenní se jeví kapitola „Kultivace..“). Výsledková část je velmi bohatá na získaná data. Shrnuté závěry vyplývají ze získaných výsledků a jsou cenným podkladem pro doložené zhodnocení výsledků, zejména v podobě podaného patentu a čtyř užitných vzorů. Tyto doložené výstupy jsou jednoznačně kladnou oponenturou vykonané práce a je nadbytečné jejich další oponování. V neposlední řadě je třeba konstatovat, že zejména z pohledu společenské relevance jsou tyto výstupy cenným dokladem jejich praktické užitečnosti, což se obecně v některých případech o vědeckých publikacích vždy říci nedá. Po formální stránce mám k práci následující připomínky: Vždy pomůže přehlednosti odlišit úrovně nadpisů stylem a typem písma, „OBSAH“ se v principu nečísluje, str. 27, 4. ř. - před “%“ chybí mezera, str. 27 – místo „sp.“ patří spp., kapitola 5.2.3, 2. a 3. ř. místo tečky oddělující desetinné místo patří čárka, stejná kapitola, 6. ř. u „metod“ chybí y, kapitola 5.2.5, 1. ř. za 2 je čárka nadbytečná, kapitola 5.2.5, 4. ř. za čárkou věta nedává smysl, str. 43, 2. odst. odspodu patří modelovými, nadpis tab. 15 a 27 – v nadpisu se opakuje slovo „kmenů“, nadpis tabulky 29 – v prvním slově chybí t, u obr. 19 – chybí vysvětlení obrázků D, E, F, u některých obrázků (např. 21, 23) jsou osy y popsány česky a osy x v jazyku anglickém - je třeba se rozhodnout pro jednotný popis, kap. 6.7.2, 2. ř. jedenkrát je slovo baktérií nadbytečné, názvy tabulek by měly být samonosné – např. tab. 8,10,12. Celkově hodnotím disertační práci RNDr. Petra Ryšávky jako velmi hodnotnou, s konstatováním, že „dizertační práce splňuje podmínky uvedené v § 47 odst. 4 zákona a prokazuje schopnost a připravenost k samostatné činnosti v oblasti výzkumu nebo vývoje nebo k samostatné teoretické a tvůrčí umělecké činnosti. Disertační práce obsahuje původní a uveřejněné výsledky a výsledky přijaté k uveřejnění“. Dotazy a připomínky mají sloužit pouze k obohacení diskuse v rámci vlastní obhajoby práce. Vzhledem k výše uvedeným skutečnostem konstatuji, že RNDr. Petr Ryšávka prokázal tvůrčí schopnosti v dané oblasti výzkumu a práce splňuje požadavky standardně kladené na disertační práce v daném oboru. Proto jednoznačně d o p o r u č u j i disertační práci RNDr. Petr Ryšávky k obhajobě. V Brně dne 29. 4. 2021 Prof. MVDr. Lenka Vorlová, Ph.D.
eVSKP id 135562